17β雌二醇(E2)是一种强效雌激素干扰物,环境残留广泛,微量即可干扰内分泌、致癌致畸,威胁生态与健康。现有高效液相色谱及质谱法需昂贵设备与专业人员,存在局限,亟需快速、灵敏、高选择性的检测方法。电致化学发光(ECL)兼具高灵敏与低背景优势。CRISPR/Cas12a系统具有独特的单链DNA反式切割活性,结合扩增效率高的EXPAR技术,可构建新型ECL检测平台。将EXPAR与Cas12a级联,有望显著提升对E2检测的灵敏度与选择性。
图1电化学发光生物传感器制备示意图
近日,谭学才团队开发了一种用于检测17β雌二醇(E2)的超灵敏电化学发光适配体传感器。本研究制备了封装有Ru(bpy)₃²⁺的ZnRuMOF材料,并开发一种基于Fc对Ru(bpy)₃²⁺ ECL信号猝灭的超灵敏E2检测平台。该平台采用与CRISPR/Cas12a系统相结合的级联等温扩增策略,并将CRISPR/Cas12a系统与传统的EXPAR方法结合,新的方法有效地减少了EXPAR中非特异性扩增的干扰信号,显著提高了方法的灵敏度和特异性。该ECL生物传感平台用于E2检测时表现出卓越的性能,具有较宽的检测范围较低的检出限,其对E2的线性范围从1 fg mL-¹到150 ng mL-¹,检测限为0.27 fg mL-¹(S/N=3)。此外,该方法具有优异的重复性和稳定性,具有较高的实用性。本研究不仅拓宽了CRISPR/Cas12a的应用范围,还为超低水平下灵敏、准确地分析环境激素提供了一个新的检测方法。
该工作以“CRISPR/Cas12a trans-cleavage cascading dual-template exponential amplification reaction for electrochemiluminescent detection of 17β-estradiol in milk”为题,于2025年8月15日在《Talanta》发表(论文链接:https://doi.org/10.1016/j.talanta.2025.127873)。我室谭学才教授为该论文的通讯作者,化学化工学院硕士研究生杜航为该论文第一作者。此项研究得到了国家自然科学基金(编号:22264004、22074130),广西重点研发计划项目(编号:AB22035080)、广西自然科学基金(2024GXNSFAA010431)、广西重点研发项目(编号:AB18126048)、广西创新驱动发展专项基金项目(编号:AA18118013-10)、广西自然科学基金青年基金项目(2025GXNSFBA069327)等经费的支持。